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    TiO2富集磷酸化蛋白质组学

    磷酸化蛋白组


            在酸性条件下,TiO2表面带正电,可与磷酸化肽段产生静电作用而达到富集效果。经TiO2富集后的多肽产物再进行液相色谱质谱(LC-MS)分析,即可获得磷酸化肽段的序列信息和磷酸键的位置信息。

     

            TiO2与iTRAQ技术的结合,可实现磷酸化蛋白组的鉴定和定量比较。在TiO2富集之前先对所有肽段进行iTRAQ标记,利用LC-MS对比样品中各磷酸化肽段iTRAQ信号强度,即可获得磷酸化蛋白组的定量信息。

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    技术路线



                   
           

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    主要仪器设备

    Q Exactive Plus 组合型四极杆 Orbitrap 质谱仪

    分辨率:140000 at m/z 200,可选 280000 at m/z 200
    扫描速率:最高12 HZ
    质量数范围:m/z 50- 6000 
    应用范围:高通量蛋白质鉴定——复杂样品
                     定量蛋白质组学——iTRAQ/TMT定量
                     修饰蛋白组分析

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    样品要求

     


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    应用方向


                        ◇  信号转导机制研究

                        ◇  新蛋白质修饰功能研究

                        ◇  新型蛋白质分子调控机制研究

    相关文献

    1. Humphrey S J, et al. High-throughput phosphoproteomics reveals in vivo insulin signaling dynamics. Nat Biotechnol, 2015, 33 (9): 990-995

    2. Zahari M S, et al. Phosphoproteomic profiling of tumor tissues identifies HSP27 Ser82 phosphorylation as a robust marker of early ischemia. Sci Rep-UK, 2015, 5: 13660