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    纳米流式(NanoFCM)外泌体检测服务

    纳米流式技术简介

          
            纳米流式检测技术(NanoFCM)可以检测低至30 nm 的外泌体的散射光信号,可以实现单个藻红蛋白分子的检测,并与背景完全区分。纳米流式检测技术可以建立起外泌体的单颗粒水平多参数定量分析标准方法,为推动外泌体在临床疾病诊断和治疗领域的广阔应用提供了坚实的技术基础。

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    纳米流式技术优势

    1、高分辨率和高精确度

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            纳米流式与透射电镜(TEM)及NTA的检测结果比较,纳米流式检测技术不仅灵敏度非常高,而且散射光的分辨率可以媲美电子显微镜。同时,由于纳米流式采用单粒子逐个测量计数的方式,所以每个粒子的信息都会记录,并以直方图的形式呈现,相较于NTA的整体预测,精确度更高。

    2、单颗粒水平多种蛋白标志物定量分析


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            用藻红蛋白(PE)对识别外泌体蛋白标志物( CD9,CD63和CD81)的单克隆抗体(MAbs)进行染色,通过纳米流式检测,可以实现在单颗粒水平对外泌体的逐个计数,并对外泌体膜表面的单个或两个蛋白标志物进行分别和组合定量分析。从分析结果中可以看出,结肠癌HCT15细胞上清中分离的外泌体CD9,CD63和CD81这三种标志物蛋白的表达量并不一致;同时表达有两种蛋白标志物的外泌体比例更少(ACS Nano. 2018;12(1):671-680)。

    纳米流式技术参数

     

    • 侧向散射灵敏度:<30nm

    • 侧向散射分辨率:40/50nm

    • 粒径检测范围:7-1000nm

    • 荧光灵敏度:FITC<10MESF

    • 样品通量:10,000 events/min

    • 样品流速:2-60μL/min





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    纳米流式其他应用



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    参考文献

    1. Tian Y et al. Protein Profiling and Sizing of Extracellular Vesicles from Colorectal Cancer Patients via Flow Cytometry. ACS Nano. 2018;12(1):671-680

    2. Ma L et al. Label-Free Analysis of Single Viruses with a Resolution Comparable to That of Electron Microscopy and the Throughput of Flow Cytometry. Angew Chem Int Ed Engl. 2016;55(35):10239-43

    3. Chen C et al. Quantification of protein copy number in single mitochondria: The Bcl-2 family proteins. Biosens Bioelectron. 2015 Dec 15;74:476-82.

    4. Zhu S et al. Light-scattering detection below the level of single fluorescent molecules for high-resolution characterization of functional nanoparticles. ACS Nano. 2014;8(10):10998-1006

    5. Yang L et al. Detection and quantification of bacterial autofluorescence at the single-cell level by a laboratory-built high-sensitivity flow cytometer. Anal Chem. 2012;84(3):1526-32